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细胞引种注意事项
发布时间:2010-05-17 阅读:1167人

尊敬的客户

    凡从我公司引种或购买细胞的客户,我公司认为已具有培养细胞的经验,因此,我们只告知引种细胞的培养条件,除此之外,一切问题概由客户自行负责。但我们承诺在客户收到细胞后的48小时内,细胞出现质量问题,我公司将负责免费再寄送一次。48小时后如果细胞出现问题,我们认为是客户的原因,不再免费重寄。如果客户希望重新寄同一种细胞,我们将按规定收取600-1000元/株成本费,这种情况下,请未付款的客户先付细胞款。为尽快发送细胞,请将付款凭据传真给我们,我们将办理再寄业务。  
    1.客户在收到细胞时,请首先观察培养瓶是否完好,培养液是否外渗,培养液是否混浊。如发现培养瓶有破损、渗漏、培养液混浊等问题,请在收到细胞后立即与我们联系,填写好《细胞质量问题表》传真至010-80191598,我们保证再免费提供一次,过时恕不免费提供。
    2.杂交瘤细胞属半悬浮生长细胞,静止培养时可附着在瓶底表面,扩增传代时直接轻轻吹打即可脱落分散,无需消化。由于运输的原因,细胞培养瓶中即使贴壁的细胞也有可能从瓶壁上脱落下来,显微镜下观察会出现细胞悬浮的情况,出现此状态时,请客户不要打开细胞培养瓶,应立即将培养瓶放置于37℃的CO2细胞培养箱过夜,并于次日在显微镜下观察,此时多数细胞会重新贴附于瓶壁。如细胞仍不能贴壁,请用台盼蓝染色法鉴定细胞活力,如台盼蓝染色证实细胞活力正常,请按本注意事项第3项下悬浮细胞的方法处理;如台盼蓝染色证实细胞无活力,请在收到细胞48小时内填写好《细胞质量问题表》并将细胞状态照片及台盼蓝染色后的照片传真至010-80191598。我们将尽快根据具体情况给您满意的回复。
    3.收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,杂交瘤细胞的倍增时间一般在10小时左右。杂交瘤细胞如细胞汇合度未超过60%;贴壁细胞汇合度未超过80%时,可将培养瓶中培养液吸出,留下约10ml培养液继续培养;如超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为杂交瘤细胞,吸出培养液、1000-1500转/分钟离心5-10分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮后移回培养瓶进一步培养。

注意事项

    1.杂交瘤细胞为半悬浮细胞,培养过程中细胞会附着在瓶底,部分细胞和死细胞碎片漂浮在培养液中,生长状况不好时,悬浮细胞会增多。
    2.附着在瓶底(贴壁)的细胞,用尖吸管轻轻吹打即可脱落,无需消化分散。
    3.收集的杂交瘤细胞的培养液,含有大量单克隆抗体,一般情况下可用于大多数免疫学检测分析,如果抗体效价(含量)偏低,可适当浓缩。
    4.新引种的细胞换液时请先采用半量换液,每次换液时加入按比例递减的条件培养基,直至逐渐转换成本地培养基。
    5.可根据需要添加双抗。
    6.多次传代培养后请考虑再次克隆化的必要。

 

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