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SDS-PAGE凝胶制备试剂盒
 

产品编号

包装

价格

8030011-S

可制40-60块胶

295.00

8030011-S1

可制100-150块胶

625.00

产品简介

  SDS-PAGE凝胶配制试剂盒(SDS-PAGE Gel Parparation Kit)提供了配制SDS-PAGE凝胶所需的各种试剂,用户只需自备制胶器具和蒸馏水,即可配制PAGE胶了。 SDS-PAGE凝胶配制试剂盒不仅可用于配制SDS-PAGE凝胶,也可用于配制非变性(native)PAGE凝胶。

    本试剂盒约可配制常规大小、不同聚合度的PAGE(即聚丙烯酰胺凝胶)50-120块。

包装

产品编号

8030011-S

8030011-S1

Acr-Bis

100ml

250ml

分离胶缓冲液(A

100ml

250ml

浓缩胶缓冲液(B

30ml

70ml

SDS

10ml

25ml

APS

0.5g

0.5gx3

TEMED

0.5ml

0.5mlx3

说明书

1

保存

    缓冲液ApH8.8)和BpH6.8),SDSAPS (Ammonium Persulfate)可室温保存。Acr-Bis(30%,29:1)TEMED 4℃避光保存。过硫酸铵配制成10%溶液后,应分装置-20℃保存,通常半年内有效。

使用说明

    1.取去离子水加入APS管中至终体积为5ml0.5ml分装,置-20℃保存备用。

    2.根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度,再按照下面的表格配制SDS-PAGE的分离胶(即下层胶)

SDS-PAGE分离胶的浓度与最佳分离范围

SDS-PAGE分离胶浓度

最佳分离范围

%

50-150kD

8%

30-90kD

10%

20-80kD

12%

12-60kD

15%

10-40kD

配制6%PAGE分离胶

成分

所需各成分的体积(毫升)

凝胶体积

7.5

10

12

15

20

30

蒸馏水

3.0

4.0

4.8

6.0

8.0

12.0

Acr-Bis

1.5

2.0

2.4

3.0

4.0

6.0

分离胶缓冲液(A)

2.85

3.8

4.6

5.7

7.6

11.4

SDS

0.075

0.1

0.12

0.15

0.2

0.3

APS

0.075

0.1

0.12

0.15

0.2

0.3

TEMED

0.006

0.008

0.096

0.012

0.016

0.024

配制8%PAGE分离胶

成分

所需各成分的体积(毫升)

凝胶体积

7.5

10

12

15

20

30

蒸馏水

2.5

3.3

4.0

5.0

6.7

10.0

Acr-Bis

2.0

2.7

3.3

4.0

5.3

8.0

分离胶缓冲液(A)

2.85

3.8

4.6

5.7

7.6

11.4

SDS

0.075

0.1

0.12

0.15

0.2

0.3

APS

0.075

0.1

0.12

0.15

0.2

0.3

TEMED

0.0045

0.006

0.0072

0.009

0.012

0.018

配制10%PAGE分离胶

成分

所需各成分的体积(毫升)

凝胶体积

7.5

10

12

15

20

30

蒸馏水

2.0

2.7

3.2

4.0

5.3

8.0

Acr-Bis

2.5

3.3

4.0

5.0

6.7

10.0

分离胶缓冲液(A)

2.85

3.8

4.6

5.7

7.6

11.4

SDS

0.075

0.1

0.12

0.15

0.2

0.3

APS

0.075

0.1

0.12

0.15

0.2

0.3

TEMED

0.003

0.004

0.005

0.006

0.008

0.012

配制12%PAGE分离胶

成分

所需各成分的体积(毫升)

凝胶体积

7.5

10

12

15

20

30

蒸馏水

1.5

2.0

2.4

3.0

4.0

6.0

Acr-Bis

3.0

4.0

4.8

6.0

8.0

12.0

分离胶缓冲液(A)

2.85

3.8

4.6

5.7

7.6

11.4

SDS

0.075

0.1

0.12

0.15

0.2

0.3

APS

0.075

0.1

0.12

0.15

0.2

0.3

TEMED

0.003

0.004

0.005

0.006

0.008

0.012

配制15%PAGE分离胶

成分

所需各成分的体积(毫升)

凝胶体积

7.5

10

12

15

20

30

蒸馏水

0.75

1.0

1.2

1.5

2.0

3.0

Acr-Bis

3.75

5.0

6.0

7.5

10.0

15.0

分离胶缓冲液(A)

2.85

3.8

4.6

5.7

7.6

11.4

SDS

0.075

0.1

0.12

0.15

0.2

0.3

APS

0.075

0.1

0.12

0.15

0.2

0.3

TEMED

0.002

0.004

0.005

0.006

0.008

0.012

             注:如需配制非变性胶,将上述配方中10%SDS换成去离子水即可。

 3. 按照如下表格配制SDS-PAGE的浓缩胶(也称上层胶、积层胶或堆积胶)配制不同体积的浓缩胶

成分

所需各成分的体积(毫升)

凝胶体积

2

3

4

5

6

8

蒸馏水

1.4

2.1

2.7

3.5

4.1

5.5

Acr-Bis

0.33

0.5

0.67

0.83

1.0

1.3

浓缩胶缓冲液(B)

0.25

0.38

0.5

0.62

0.75

1.0

SDS

0.02

0.03

0.04

0.05

0.06

0.08

APS

0.02

0.03

0.04

0.05

0.06

0.08

TEMED

0.002

0.003

0.004

0.005

0.006

0.008

注意事项

    APS的水溶液不稳定,应置-20℃保存。每次取用后应立即放回冰箱,尽量减少室温存放时间,以防失效。如发现凝胶聚合不好,应考虑丢弃使用过的APS,更换新配制的APS

    另外PAGE凝聚的速度和温度及催化剂的用量关系密切,在其它条件不变的情况下,可通过改变TEMED的用量,控制PAGE凝胶的聚合速度,凝胶聚合过快不利于操作。

    操作中,特别是液体的混匀应尽量避免气泡的产生。

    未聚合的丙烯酰胺有毒,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

电泳图片

 

 

 

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