产品简介

　　蛋白质定量是蛋白质研究的基础工作之一。BCA(Bicinchoninic Acid)是理想的蛋白质定量方法;是当前比Lowry法更优越的专用于检测总蛋白质含量的产品。该方法以快速灵敏、稳定可靠，对不同种类蛋白质检测的变异系数非常小而倍受专业人士的青睐。BCA法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响。在组织细胞裂解实验中，常用浓度的去垢剂SDS，Triton X-100，Tween不影响检测结果，但受螯合剂(EDTA，EGTA)、还原剂（DTT，巯基乙醇）和脂类的影响。实验中，若发现样品稀释液或裂解液本身背景值较高，可试用Bradford蛋白浓度测定试剂盒,该产品不受此影响。因此，BCA试剂与之配合使用，可免除您实验中的许多烦恼。

    基本原理

    碱性条件下，蛋白将Cu2+还原为Cu+， Cu+与BCA试剂形成紫颜色的络合物，测定其在562nm处的吸收值，并与标准曲线对比，即可计算待测蛋白的浓度。

    主要特点

    1.准确灵敏, 线性范围广: BCA试剂的蛋白质测定范围是10－2000ug/ml。

    2.快速：45分钟内完成测定，比经典的Lowry法快4倍而且更加方便。

    3.经济实用：在微孔板中进行测定，可大大节约样品和试剂用量。

    4.不受样品中离子型和非离子型去污剂影响。

    5.检测不同蛋白质分子的变异系数远小于考马氏亮蓝。

包装

保存

    BCA试剂 A, B 室温保存，本试剂盒自订购之日起一年内有效。

使用说明

    1.配制工作液: 根据标准品和样品数量，按50体积BCA试剂A加1体积BCA试剂B（50:1）配制适量BCA工作液，充分混匀。BCA工作液室温24小时内稳定。

    2.稀释标准品：取蛋白标准品用PBS稀释，使终浓度为0.5mg/ml。将标准品按0, 1, 2, 4, 8, 12, 16, 20微升加到96孔板的蛋白标准品孔中，加PBS补足到20微升。

    3.加适当体积样品到96孔板的样品孔中，补加PBS到20微升。

    4.各孔加入200微升BCA工作液，37℃放置30分钟。

    5.冷却到室温，用酶标仪测定A562，根据标准曲线计算出蛋白浓度。

    点击下载说明书（点击右键，选择“目标另存为”，可下载本说明书）

注意事项

    1.在低温条件或长期保存出现沉淀时，可搅拌或37℃温育使溶解, 如发现细菌污染则应丢弃。 

    2.样品中若含有EDTA、EGTA、DTT、硫酸铵、脂类会影响检测结果，请试用Bradford蛋白浓度测定试剂盒；高浓度的去垢剂也影响实验结果，可用TCA沉淀去除干扰物质。 

    3.要得到更为精确的蛋白浓度结果，每个蛋白梯度和样品均需做复孔, 每次均应做标准曲线。 

    4.当试剂A和B混合时可能会有浑浊，但混匀后就会消失，工作液在密闭情况下可保存1周。 

    5.需准备37℃水浴或温箱、酶标仪或普通分光光度计，测定波长为540-595nm之间，562nm最佳。酶标仪需与96孔酶标板配套使用。使用分光光度计测定蛋白浓度时，试剂盒测定的样品数量会因此而减少。使用温箱孵育时，应注意防止因水粉蒸发影响检测结果。