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蓝琼脂糖凝胶

 产品编号

包装

价格

8060002-S

5ml

580.00

8060002-S1

10ml

980.00

8060002-S2

25ml

1800.00

产品简介 

蓝琼脂糖凝胶(BlueRose)是将蓝色染料F3GA键合在琼脂糖凝胶上形成的一种可利用染料基团亲和作用来实现目标产品纯化分离的亲和色谱介质,常用于生物大分子如白蛋白、核糖体灭活蛋白(RIP)、核苷酸辅助的酶、干扰素和凝血因子等的纯化分离。本品基质为4%交联琼脂糖蓝色球形凝胶,粒径 50-160 μm,无嗅、无味、肉眼无可见杂质。蛋白质吸附容量(HSA15mg/ml ,最高流速(25) 26cm/h,耐 压0.02MPa,工作温度 4-40 pH适用范围pH3-11 (短时间)

包装 

 产品编号

5ml

10ml

25ml

蓝琼脂糖凝胶

8060002-S

8060002-S1

8060002-S2

说明书

1 

保存 

2-8℃密封贮存(保存溶液为20%乙醇+0.1mol/L K2HPO4,pH8.0),有效期3年以上。禁冷冻。

使用说明 

蓝色高流速琼脂糖微球是一种亲和色谱介质,利用样品中组分与配基亲和性的不同进行分离。用于用于生物大分子如白蛋白、干扰素和凝血因子等的纯化分离。

下面简要介绍介质的使用过程:

    1。装柱

让所有的材料和试剂达到室温。配制初始缓冲液(平衡液)和洗脱缓冲液。如样品为白蛋白,使用的缓冲液如下:初始缓冲液(平衡液):0.05mol/ L K2HPO4,pH5-7(pH不同,吸附量不同); 洗脱缓冲液:0.05mol/LKH2PO4+1.5mol/ L KCl,pH7.0

根据柱子大小取所需量的凝胶,清洗掉20%乙醇,抽干,用初始缓冲液(按凝胶:缓冲液=31的比例)配成匀浆。匀浆作脱气处理。

将柱内及柱子底端用水或缓冲液润湿并保持一小段液位(液面略高于滤膜),务必使底端无气泡。

用玻璃棒引导匀浆沿着柱内壁一次性倒入柱内,注意勿使产生气泡。打开柱子出液口,使凝胶在柱内自由沉降,连结好柱子顶端柱头。

打开蠕动泵,让缓冲液用使用时流速的1.33倍的流速流过,使柱床稳定。用2~3倍柱床体积的缓冲液平衡柱子。

    2。平衡

让平衡缓冲液以一定流速流过柱子,到流出液电导和pH不变。

    3 上样

样品用平衡液配制,浑浊的样品要离心和过滤后上样。一般情况是让目标产品结合在柱子上,用平衡液洗去不结合的杂蛋白。

    4。洗脱

再选择一种洗脱液洗下目标产品。

    5。再生

一般用高盐浓度的洗脱缓冲液洗,洗10倍以上柱体积,接着用结合蛋白的平衡液洗到平衡,可再次使用。若有失活蛋白质或脂类物质在再生时洗不掉,可用在位清洗(CIP)除去。

    6。在位清洗

对沉淀蛋白,可用4倍柱体积0.1mol/L NaOH 低流速洗脱,接着用4倍柱体积2 mol/L KSCN洗涤,马上用5倍柱体积pH8.0的初始缓冲溶液洗涤。

对强结合的蛋白、脂类等,用4~10倍柱体积的70%乙醇或30%异丙醇清洗,但要注意有机溶剂的浓度以梯度的方式逐渐增加,否则容易产生气泡。再马上用5倍柱体积pH8.0的缓冲溶液洗涤。

注意事项

在装柱、使用和保存柱子的时候,要避免柱子流干,气泡进入。

 

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