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细胞增殖与细胞毒检测试剂盒

产品编号

包装

价格

6010007-M

300T

198.00

6010007-M1

500T

320.00

6010007-M2

1000T

600.00

产品简介

  噻唑兰(Methylthiazoletetrazolium, MTT)是一种可接受氢离子的淡黄色唑氮盐染料,被活细胞线粒体呼吸链中的琥珀酸脱氢酶和细胞色素C还原,使Tetrazolium环开裂,生成水不溶的深紫色结晶产物甲簪(Formazan)。死细胞因丧失琥珀酸脱氢酶活性,因此甲簪的生成量仅与活细胞数目成正比。在特定溶剂存在的情况下,甲簪可以被完全溶解,借助酶标仪测定570nm波长附近的吸光度,可推算出活细胞的数量或细胞存活率。细胞增殖速度越快,则甲簪生成的量越多,吸光度越高;细胞毒性越大,则甲簪生成的量越少,吸光度越低。由于操作简便,成本低,不污染环境,克服了传统的同位素掺入或释放实验等操作复杂,成本高,对仪器设备和实验室条件要求高,难于防护等因素,而被广泛地用于细胞增殖和细胞毒性的检测。

    细胞增殖与细胞毒检测试剂盒(Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit)MTT为指示剂,在经典操作方法的基础上,采用了独特的甲簪溶解液,可以直接溶解甲簪,而无需离心去除原有的培养液,故可避免因甲簪部分被吸除而引起的操作误差,具有本底低,灵敏度高,线性范围宽,操作简便等特点。 

包装 

产品编号

6010007-M

6010007-M1

6010007-M2

MTT染色液

6ml

10ml

10ml×2

Formazan溶解液

30ml

50ml

100ml

说明书

1

保存

    MTT溶液-20℃保存,一年有效;Formazan溶解液室温或-20℃保存。

使用说明

    1. 细胞的增殖和细胞毒实验,一般可在96孔细胞培养板中进行。

    2. 每孔加入100微升细胞悬液。细胞的数量取决于实验目的和培养时间。增殖实验每孔通常加入103个以上数量的细胞;细胞毒性实验每孔至少加入5x103个或以上数量的细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等因素确定)

    3. 接种的细胞按照实验需要,送入细胞培养箱进行培养。增殖实验通常要给予0-10微升特定的药物或生长因子进行刺激。细胞毒实验通常要给予0-10微升抑制因子或细胞毒药物;

    4.培养结束后,每孔加入20微升MTT溶液,在细胞培养箱内继续孵育36小时;  

    5.孵育结束后,每孔加入100微升Formanzan溶解液,在37℃细胞培养箱内再继续孵育,直至在镜下观察formazan全部溶解。通常37℃孵育4小时左右,紫色结晶会全部溶解。如果紫色结晶较小较少,溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大较多,溶解的时间会略长。 

    6. 570nm测定吸光度。如无570nm滤光片, 560-600nm范围的滤光片均可使用。

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