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淋巴细胞分离液

 产品编号

包装

价格

6010010-L

30ml

48.00

6010010-L1

70ml

88.00

6010010-L2

120ml

118.00

产品简介

    淋巴细胞分离液是一种根据细胞密度差异,借助离心产生的重力加速度,进行细胞的分离纯化的常用试剂。从外周血、骨髓、外周淋巴器官或各种组织分离出来的细胞是多种细胞的混合物,如要研究某种特定细胞的结构、功能或表面标志等特征,首先要分离纯化细胞。根据细胞的大小、密度、表面荷电、吸附能力或表面抗原的差异可实现对目的细胞的分离、纯化,常用的细胞分离与纯化方法有密度梯度沉降法、细胞电泳、贴附、亲和层析、花环形成、补体介导杀伤溶解以及流式细胞仪(FCM)和免疫磁珠分选等。密度梯度沉降法是根据细胞密度差异,借助细胞分离液和离心,进行细胞分离纯化的常用方法之一。细胞分离液则是一类能产生一定程度的密度梯度,高密度时粘度不高,浓度不同时渗透压变化不大,经洗涤去除后能用于体外培养,而对细胞没有毒性。最常用的细胞分离液有FicollPercollFicoll是蔗糖的多聚体,呈中性,吸水性强,平均分子量为400,000,当密度为1.2g/ml仍未超出正常生理性渗透压,也不穿过生物膜。红细胞、粒细胞比重大,离心后沉于管底;淋巴细胞和单核细胞的比重小于或等于分层液比重,离心后漂浮于分层液的液面上,也可有少部分细胞悬浮在分层液中。吸取分层液液面的细胞,就可从外周血中分离到单个核细胞。 

    翰谱医药生产的淋巴细胞分离液(Lymphocytes Separation Medium)以进口Ficoll和泛影酸钠为主原材料,配制成密度为1.077的,无菌溶液。该产品适用于人淋巴细胞和大多数哺乳动物细胞的分离纯化,能除去红细胞和死细胞碎片。

包装

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6010010-L

6010010-L1

6010010-L2

淋巴细胞分离液

30ml

70ml

120ml

说明书

1 

保存

    2-8℃避光保存。

使用说明

    1.在离心管中加入适量淋巴细胞分离液。

  2.取抗凝血与等量Hanks液或平衡盐溶液充分混匀,用滴管沿管壁缓慢叠加于分层液面上,注意保持两液面界面清晰,水平离心2000rpm×20分钟。

  3.离心后,管内液体分为三层,上层为血浆和Hanks液,下层主要为红细胞和粒细胞。中层为淋巴细胞分离液,在中上层液面处有一白色云雾层狭窄带,即为富含淋巴细胞和单核细胞的单个核细胞(PBMC)及血小板。

    4.吸去最上层的血浆,收集血浆层和淋巴细胞分离液交界面的单个核细胞,尽量全部吸出PBMC,移入一新的离心管中;

    5.加入Hanks’液或无血清培养液,混匀后离心200×g 10分钟,弃去上清液(低速离心有利于去除细胞悬液中留存的血小板)。

    6.再用同样洗涤液洗涤细胞2次,每次离心500×g 10分钟,以洗去残留的淋巴细胞分离液。再用细胞培养液将细胞调配成适当浓度。通常,每毫升外周血可得12×106PBMC

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