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髓过氧化物酶染色试剂盒
 

产品编号

包装

价格

8020074-M

50T

580.00

8020074-M1

120T

1080.00

产品简介

髓过氧化物酶(MyeloperoxidaseMPO)是嗜天青颗粒中一种溶酶体酶,多存在于线粒体和溶酶体中,主要功能是破坏生物氧化过程中生成的有害的过氧化物,使其放出氧,参加细胞内氧化还原过程,是一种与生物氧化有关的重要酶类。细胞内的过氧化物酶在过氧化氢(H2O2)存在时,能借助受氢体催化H2O2分解释放出活性氧,将受氢体联苯胺(DAB)氧化成联苯胺蓝,后者不稳定,进一步脱氢氧化,形成棕黄色苯醌二胺沉淀。MPO染色主要用于白血病的鉴别诊断和研究

髓过氧化物酶染色试剂盒(Myeloperoxidase Staining KitMPO)采用进口试剂为原料配制而成,操作简单,使用方便,贮存稳定。可广泛用于血液细胞学的教学与科研。

包装

髓过氧化物酶染色试剂盒

8020074-M

8020074-M1

试剂A(25X)

0.4ml

1ml

试剂B(25X)

0.4ml

1ml

试剂C(固定液)

30ml

70ml

试剂D(复染液)

10ml

30ml

使用说明书

1

1

保存

试剂盒4℃保存,AB,C液置-20℃保存,避免污染和挥发。

使用说明 

   染色操作步骤:

   1.配制染色工作液:取去离子水920ul,加入A显色液40ul混匀,再加入B显色液40ul的,混匀后即可使用。

2.新鲜涂片空气干燥,滴加数滴C液固定1分钟,流水冲洗2分钟。

3.滴加新鲜配制工作液数滴,置湿盒内室温孵育10-30分钟,流水冲洗2分钟。

4.滴加D液数滴,复染10分钟,流水冲洗3- 5分钟,晾干。 

结果判断:

粒细胞胞浆酶活性部位呈现棕黄色沉淀,胞核染为蓝色。计数100200个中性粒细胞求出阳性率和阳性指数。

0 胞浆无阳性颗粒

1+:胞浆出现少量阳性颗粒

2+:阳性颗粒较多    

3+:阳性颗粒很多

4+:阳性颗粒布满胞浆,遮盖胞核

注意事项

   1.本试剂盒置4℃保存,AB,C液置冰盒内保存,避免污染和挥发。

2.储备液出现沉淀复溶后仍可使用,不影响染色效果。

3.操作时要戴防护手套或用具,避免直接接触,一旦接触请用流水冲洗。

4.孵育应在湿盒中进行。

5.复染只是为了便于观察结果而进行的衬染,也可视具体情况予以取消。取消复染时,为便于观察,也可以在酸性条件下显色,阳性细胞染成蓝色。 

附:涂片制备及保存方法 

    1. 全血和骨髓涂片:选择厚薄均匀适中的推片,室温干燥4-12小时,用洁净白纸成对包好(两张涂片的血膜面向外),放在装有干燥剂(变色硅胶颗粒)的塑料小袋中,封紧袋口,用记号笔做好标记,置-20(可保存两周)。染色前取出小袋,平衡至室温(10-20分钟)打开小袋,取出涂片,进行固定和染色。

    2. 分离细胞离心涂片:骨髓或外周血2-3ml,加肝素(25μ/ml)抗凝,用PBS12-3稀释,用玻璃吸管取3-4ml稀释血样沿圆底离心管壁缓慢加入到含有2-3ml淋巴细胞分离液(6010010-L)的上层,使两液间保持清晰界面。离心(1500/)15-20分钟,取出离心管(勿摇晃和倾斜),用细口径玻璃吸管仔细吸出富含白细胞层(单个核细胞),加5-6ml PBS混匀,再次离心(1500/)10分钟,弃上清,加少量PBS,重悬细胞使分散为单细胞悬液。涂片方法:取分离好的单个核细胞50μl在细胞离心涂片机上涂片。或在玻片上推片;或用吸管在玻片上轻轻涂开细胞悬液,待细胞沉降后用吸水纸沿标本周边吸去多余的液体,室温晾干4-12小时,保存方法同上。

 

更新时间:2016-05-24    浏览次数:1149次
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